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高床保育舍空氣微生物檢測簡易方法

發(fā)布日期：2016-10-11點擊次數(shù)：1498

高床保育舍/仔豬舍由于空間電場凈化微生物氣溶膠的特殊性（空氣微生物荷電后做趨向培養(yǎng)皿的定向移動）故不能采用常規(guī)的落菌檢測方法，故在此處推薦采用以下簡易定量測定法。如有條件，則可以采用空氣微生物采樣器進行采樣測定。

實驗分析：本實驗采用簡易定量測定法，用無菌注射器定量抽取空氣，將所取空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)部，經(jīng)培養(yǎng)后，即可定量、定性測定空氣中細菌、真菌等微生物，此法簡單易行。

采樣點：設豬床下方15cm為采樣區(qū)域，各點每天分別選在8：00、11：00、15：00、20：00、22：00進行，連續(xù)2-3天，按照“田”字形進行樣品的采集，菌落數(shù)取平均值。

實驗一、細菌總量的測定

1、實驗儀器：無菌注射器、無菌培養(yǎng)皿、溫濕度培養(yǎng)箱。

2、實驗試劑：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

3、實驗步驟：

（1）按比例配制培養(yǎng)細菌用的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，滅菌后融化，在50℃水浴中保溫備用。

（2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100ml。

（3）在無菌操作下，取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養(yǎng)基深處，緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固，置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后統(tǒng)計細菌菌落數(shù)量，推算1L空氣所含細菌量。。

4、環(huán)境因素測定：采樣同時記錄豬舍內(nèi)外相對溫度和濕度。

5、實驗結果：

計數(shù)菌落形成單位數(shù)（CFU），空氣中微生物濃度按奧梅梁斯基氏法計算。

微生物密度測定記錄：將計算結果填入表。

6、按平均值繪制日變化曲線。

7、對照舍重復以上步驟。

實驗二、真菌總量的測定

1、實驗儀器：無菌注射器、無菌培養(yǎng)皿、溫濕度培養(yǎng)箱。

2、實驗試劑：PDA培養(yǎng)基。

3、實驗步驟：

（1）配制培養(yǎng)真菌用的PDA培養(yǎng)基，滅菌后融化，在50℃水浴中保溫備用。

（2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100ml。

（3）在無菌操作下，取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養(yǎng)基深處，緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固，置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)5d后統(tǒng)計真菌菌落數(shù)量，推算1L空氣所含真菌量。統(tǒng)計霉菌數(shù)量時培養(yǎng)的時間稍許延長。應用此法需多做平行試驗，求其平均值以提高性。